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      隱藏福利:3個液相色譜柱的小知識,多了怕

      更新時間:2021-05-31      點擊次數:2369
        本儀個圓今天掐指一算,好像有段日子沒有給大家發福利了,就想著什么樣的福利才是大多數人都需要的呢?
       
        最后小編把主意放到了我們行業內的“四大名譜”上,然后又在四大譜里pick了我們的液相色譜!畢竟其他三譜前一陣子都開設了訓練營,相信小伙伴們都不會care我的小知識了!
       
        而液相色譜柱的使用應該是液相的新人同學都比較頭疼的事,為什么...新買不久的柱子,這么快就要“退休”呢?!其實也不怪你...是他太脆弱!當然你照顧好他也還是會堅守崗位的!而延長液相色譜柱壽命的問題上網一搜也是層出不窮,看來大家都比較在意這嬌弱的柱子呀!
       
        然后奉上今天的3個小知識,進一步的了解色譜柱,說不定就能讓他多堅持一會兒哦!(福利在文章底部【小知識后面】!不要傻傻的直接劃走!)
       
        01.怎樣提高液相色譜柱的柱效?
       
        解答:(1)要想提高液相色譜法的柱效,應當用小而均勻的固定相顆粒填充均勻,以減小渦流擴散和流動相傳質阻力,這是最佳的提升柱效的方法。
       
        (2)選用低黏度的流動相(如甲醇、乙腈等),也有利于減小傳質阻力,提高柱效。
       
        (3)合適的柱溫也會影響到柱效。
       
        (4)降低流速、增加柱長也可以提高柱效。
       
        02.液相色譜柱保護柱有何作用?
       
        解答:(1)在使用高效液相色譜儀分析檢測樣品的過程中,液相色譜柱會受到來自于樣品及色譜系統的污染,從而導致液相色譜柱耐用性差、壽命縮短。來自于色譜系統的污染主要指:
       
        a.液相色譜儀器系統中部件磨損而產生的固體顆粒;
       
        b.流動相系統過濾不*殘留的固體顆粒;
       
        來自于樣品的污染主要指:
       
        a.未*溶解的樣品或者已*溶解的樣品進入色譜系統中;
       
        b.由于樣品溶劑和流動相溶劑對樣品溶解存在的溶解度差異,導致沉淀析出污染系統。
       
        特別是對于中藥、天然產物、合成中間體及生物藥品的檢測,因基質的復雜性,色譜柱受污染的情況會更加嚴重。
       
        (2)污染會導致色譜系統壓力升高、色譜柱塌陷、填料變色等,從而帶來檢測成本高,測試結果不準確等各種影響。
       
        (3)保護柱是液相色譜分析中重要的色譜耗材,使用保護柱可大大降低分析柱受污染的程度,延長分析柱使用壽命。
       
        (4)保護柱位于進樣器與分析柱之間,作用主要兩方面:
       
        a.截留不溶性顆粒;
       
        b.吸附樣品基質中的雜質。
       
        03.如何測試液相色譜柱的柱效?
       
        解答:JJG705-2014《液相色譜儀檢定規程》中規定了液相色譜柱柱效的測試方法,具體測試方法如下:
       
        (1)測試用標準溶液:反相色譜柱測試用的標準溶液為1×10-4g/mL尿嘧啶、1×10-5g/mL聯苯和蒽(荼)的甲醇溶液;正相色譜柱測試用的標準溶液為1×10-2mL/mL甲苯和1×10-4mL/mL硝基苯的正己烷溶液。
       
        (2)將被測試的色譜柱接到檢定合格的液相色譜儀器上,反相柱用甲醇+水(85%+15%)為流動相,正相柱用正己烷+異丙醇(99.5%+0.5%)為流動相,流速為1mm/s(內徑為4.6mm色譜柱,流量為1.0mL/min),紫外檢測器波長為254nm,靈敏度選擇適中。儀器穩定后,從進樣口注入10μL對應的色譜柱測試標準溶液,記錄色譜圖。
       
        (3)柱效(理論塔板數)和色譜峰對稱性的計算
       
        由式(2-1)計算液相色譜柱柱效理論塔板數,重復測量3次,取平均值。
       
        (2-1)中,n為理論塔板數;tR為色譜峰的保留時間,時間測量需精確到0.02min;為色譜峰半高峰寬;L為色譜柱長。按照上述條件測得的色譜圖中,按式2-2計算色譜峰的不對稱因子As。
       
        As=b/α
       
        (2-2)式中,a,b分別為通過圖片峰高處、平行于峰底的直線被峰兩側及峰高截取的兩線段的長度。
       
        (4)液相色譜柱性能要求
       
        柱效:反相色譜柱的理論塔板數一般在3~4×104m-1范圍內,正相色譜柱的理論塔板數在4~5×104m-1范圍內。
       
        色譜峰對稱性:被測峰(蒽)的不對稱因子As一般在0.8~1.6范圍內。

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